基因序列在體外能做到無線擴增?

    述PCR的三個反應(yīng)步驟循環(huán)往復(fù)，使得特定長度的靶DNA數(shù)量呈指數(shù)上升。在理論上，終產(chǎn)物DNA的量可用Yn=X•2n計算。其中X為原始模板的數(shù)量，Yn為n循環(huán)后DNA片段終產(chǎn)物的拷貝數(shù)，n為擴增循環(huán)數(shù)。但在實際擴增過程中，不可能達到理想狀況下的100%擴增效率，因此，公式Y(jié)n=X•2n中2可以（1十E）來代替，而得到Y(jié)n=X•（1十E）n，E為平均擴增效率，理論值為100%，亦即為1，但在實際反應(yīng)中平均效率達不到理論值。

    擴增起始期，靶序列DNA片段的增加呈指數(shù)形式，但隨著擴增產(chǎn)物的逐漸累積，其對擴增過程出現(xiàn)負作用，再加上酶的消耗疲勞，整個擴增將進入線性增長期或平臺期，此時，擴增產(chǎn)物不再呈指數(shù)增加，出現(xiàn)“停滯”。

    PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，人類許多常見的腫瘤疾病與某些腫瘤相關(guān)基因的遺傳學(xué)改變有著密切的關(guān)系，可以通過PCR或?qū)CR與其他技術(shù)結(jié)合使用來檢測基因序列的改變，對疾病進行輔助診斷或者早期評估。在進行產(chǎn)前診斷時，利用胎兒羊膜細胞、羊水甚至母親血液便可以檢查出胎兒的性別，這在與性染色體關(guān)聯(lián)遺傳病診斷中是很有必要的。PCR技術(shù)已在臨床中應(yīng)用多年，為腫瘤前期篩查，優(yōu)生優(yōu)育做出了巨大的貢獻。

    PCR檢測技術(shù)在傳染病檢測領(lǐng)域尤其在病毒性傳染病的快速確認中也發(fā)揮了不可替代的作用，如2009年甲型HIN1流感病毒、2013年H7N9禽流感病毒、2019年新型冠狀病毒等近年來發(fā)生的重大病毒性傳染病疫情，從病例的確認、排查到疾病的監(jiān)測等工作中，PCR 檢測技術(shù)均發(fā)揮了重要作用。

    PCR技術(shù)在檢驗檢疫領(lǐng)域中的應(yīng)用，如在出入境檢驗檢疫工作中，既可保證樣品檢測的準確性和可靠性，又可節(jié)省大量的人力、物力和財力。目前國內(nèi)相關(guān)檢驗檢疫部門已正式應(yīng)用QPCR檢驗方法來檢測禽流感病毒、新城疫病毒、口蹄疫病毒、豬藍耳病毒等動物病毒，以及豬鏈球菌、炭疽、大腸桿菌0157等動物細菌，為有效控制傳染性動物疫情在國際的傳播起到顯著的作用。